Wetland Ecobiology

fa بهینه سازی و خالص سازی جزئی آنزیم پروتئاز، لیپاز و آمیلاز از سویه جدید شناسایی‌شدهAeromonas taiwanensis strain Persiangulf ST16 در شمال خلیج فارس Optimization and partial purification of protease, lipase and amylase enzymes from the newly identified strain of Aeromonas taiwanensis strain Persiangulf ST16 in the northern Persian Gulf تخصصي Special پژوهشي Research <div style="text-align: justify;">آنزیمهای میکروبی جداشده از محیطهای دریایی، به دلیل داشتن ویژگیهای منحصربه‌فرد، کاربرد ویژهای در صنایع مختلف پیداکرده‌اند. خلیجفارس به دلیل داشتن تنوع زیستی فراوان، یک مکان بکر برای جداسازی سویه‌های باکتریایی با پتانسیل تولید آنزیمهای جدید میباشد. پروتئاز، لیپاز و آمیلاز ازجمله پرمصرف‌ترین آنزیم‌ها در صنایع مختلف هستند و با توجه به افزایش اهمیت و تقاضا نسبت به آنزیم‌های میکروبی- دریایی در صنایع، این مطالعه باهدف بهینهسازی و خالصسازی جزئی این آنزیمها از سویه‌های جدید جداشده در بندر چوئبده (شمال خلیجفارس) برای اولین بار انجام شد. نمونه‌برداری در آبان سال 1398 از 10 ایستگاه مختلف (نمونه‌ آب و رسوب) انجام شد. سویه جدید، Aeromonas taiwanensis - Persiangulf ST16 باقابلیت تولید پروتئاز، لیپاز و آمیلاز با بررسی فیلوژنیک توالی S rRNA16 شناسایی شد. شرایط بهینه برای رشد این باکتری شامل دمای 37-30 درجه سانتیگراد، 6 = pH و غلظت نمک 5/2 درصد بود. بیشترین فعالیت آنزیمی برای هر سه آنزیم در روز دوم انکوباسیون مشاهده شد. بیشترین تولید پروتئاز در دمای 37 درجه سانتیگراد، 7 =pH، حضور مالتوز به‌عنوان منبع کربن و کازئین به‌عنوان منبع نیتروژن گزارش شد و کمترین میزان در حضور دکستروز و عصاره گوشت مشاهده شد. شرایط بهینه برای تولید لیپاز در دمای 37 درجه سانتیگراد، 7-6 = pH و در حضور روغن‌زیتون و تریپتون بود و استفاده از توئین 20 و کازئین باعث تولید کمترین میزان آنزیم شد. تولید بهینه آمیلاز در دمای 35 درجه سانتیگراد، 7 =pH و استفاده از نشاسته و عصاره مخمر مشاهده شد، اما سوربیتول و سولفات آمونیوم، کمترین میزان تولید را القاء کردند. در طی مراحل خالصسازی، فعالیت ویژه هر سه آنزیم افزایش یافت و همچنین در مرحله آخر خالصسازی، آنزیمهای پروتئاز، لیپاز و آمیلاز به ترتیب 23/16، 69/2 و 43/2 برابر نسبت به آنزیم خام خالصسازی شدند. بهینهسازی تولید هر سه آنزیم با فعالیت قابل‌توجه توسط سویه Aeromonas taiwanensis- Persiangulf ST16 نشان داد که این باکتری میتواند کاندیدای مناسبی برای مطالعات بیشتر و استفاده در صنعت باشد.</div> <div style="text-align: justify;">Microbial enzymes isolated from marine environments have found special applications in various industries, due to their unique properties. The Persian Gulf is a pristine place for the isolation of bacterial strains with the potential to produce new enzymes due to its rich biodiversity. Protease, lipase, and amylase are among the most widely used enzymes in various industries and due to the increasing importance and demand for microbial-marine enzymes in industry, this study aims to optimize and partial purify these enzymes from new strains isolated in port. Choubdeh (north of the Persian Gulf) was performed for the first time. Sampling was performed in November 2019 from 10 different stations (water and sediment samples). A new strain, Aeromonas taiwanensis - Persiangulf ST16 (accession number: OM189448) capable of producing protease, lipase, and amylase were identified by phylogenetic analysis of 16 SrRNA sequences. Optimal conditions for the growth of this bacterium included temperature of 30-37 ° C, pH 6, and salt concentration of 2.5%. The highest enzyme activity was observed for all three enzymes on the second day of incubation. The highest production of protease was reported at 37 ° C, pH 7, with the presence of maltose as a source of carbon and casein as a source of nitrogen, and the lowest was observed in the presence of dextrose and Beaf extract. The optimal conditions for lipase production at 37 ° C were 6-7 pH, and in the presence of olive oil and tryptone. The use of tween 20 and casein produced the lowest amount of enzyme. Optimal amylase production was observed at 35 ° C, pH 7, and the use of starch and yeast extract, but sorbitol and ammonium sulfate-induced the lowest production. During the purification steps, the specific activity of all three enzymes increased so that in the last stage of purification, protease, lipase, and amylase enzymes were purified by 16.23, 2.69, and 2.43 times respectively compared to the crude enzyme. Optimization of production of all three enzymes with significant activity by Aeromonas taiwanensis-Persiangulf ST16 showed that this bacterium could be a good candidate for further studies and use in industry.</div> Aeromonas taiwanensis, پروتئاز, لیپاز, آمیلاز, خلیج‌فارس. Aeromonas taiwanensis, Protease, Lipase, Amylase, Persian Gulf. 37 52 http://jweb.ahvaz.iau.ir/browse.php?a_code=A-10-739-2&slc_lang=fa&sid=1 Sara Taghavi سارا تقوی 10031947532846006704 10031947532846006704 No Roya Zekavati رویا ذکاوتی 10031947532846006705 10031947532846006705 Yes Effat Abbasi Montazeri عفت عباسی منتظری 10031947532846006706 10031947532846006706 No Laleh Roomiani لاله رومیانی 10031947532846006707 10031947532846006707 No Parvaneh Saffarian پروانه صفاریان 10031947532846006708 10031947532846006708 No